在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的技术,用于分离和分析DNA片段。
在分子生物学实验中,DNA合成是许多关键技术的核心,而dNTP Set Solution(脱氧核糖核苷三磷酸溶液套装)则是实现精准DNA合成的必备工具。dNTP Set Solution包含四种脱氧核苷三磷酸(dATP、dCTP、dTTP、dGTP),每种浓度均为100 mM,为各种需要DNA合成的实验提供了强大支持。 DNA合成是生命科学中最基本的生物化学过程之一,无论是PCR扩增、基因克隆还是DNA测序,都离不开dNTPs的参与。dNTP Set Solution中的四种脱氧核苷三磷酸是DNA合成的基本单元,它们在DNA聚合酶的作用下,按照碱基互补配对原则嵌入到新合成的DNA链中。每种dNTP的高浓度(100 mM)设计确保了在反应过程中有足够的原料供应,从而提高反应的效率和灵敏度。 dNTP Set Solution的高纯度和高浓度特性使其在多种实验中表现出色。例如,在PCR反应中,准确的dNTP浓度对于反应的特异性和准确性至关重要。dNTP Set Solution能够确保四种dNTP的比例一致,避免因某一种dNTP过量或不足而导致的扩增偏差。
其中,2500 bp条带的浓度较高(约100 ng/5 µL),显示为加亮带,便于在电泳后快速定位。
50×TAE液体是一种高浓度的缓冲液,广泛应用于核酸电泳实验中,特别是在琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳中。TAE是Tris-Acetate-EDTA缓冲液的缩写,其主要成分包括三羟甲基氨基甲烷(Tris base)、乙酸(acetic acid)和乙二胺四乙酸(EDTA)。产品特性高效分离:TAE缓冲液在电泳大于13 kb的DNA片段时,能够取得更好的分离效果。迁移率快:双链线状DNA在TAE缓冲液中的迁移率较其他缓冲液快约10%。适用范围广:适用于基因组DNA、大分子超螺旋DNA、大于1500 bp的RNA和DNA的电泳分离。即用型设计:50×TAE液体为浓缩液,使用时只需用去离子水稀释50倍即可。使用方法配制1×TAE工作液:取20 mL的50×TAE液体,加入980 mL去离子水,充分混匀。电泳条件:凝胶浓度:通常使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。 电泳电压:建议4-10 V/cm,电泳时间根据片段大小调整。保存条件:室温保存,有效期一般为12个月。注意事项沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。
SYBR Green qPCR Mix通过比较目标基因与参考基因的Ct值,实现基因表达水平的定量分析
GTBE电泳缓冲液(10×)是一种专为DNA电泳设计的高浓度缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它由甘氨酸和TBE(Tris-Borate-EDTA)组成,特别适用于脉冲场凝胶电泳(PFGE)。产品特性成分:主要由甘氨酸、TBE缓冲液(Tris-Borate-EDTA)和防腐剂组成。缓冲能力:缓冲能力较弱,特别适合分离小于2000 bp的DNA片段。 即用型设计:10×浓缩液,使用时需用去离子水稀释10倍至1×后使用。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释缓冲液:将10×GTBE缓冲液用去离子水稀释10倍,制备1×工作液。制备凝胶:使用1×GTBE缓冲液制备琼脂糖凝胶。电泳操作:将样品加入凝胶加样孔中,进行电泳。电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的DNA染料(如EB或Goldview)染色,在紫外灯下观察DNA条带。保存与注意事项保存条件:室温保存,开封后尽快使用,有效期为12个月。个人防护:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。用途限制:仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。
EB与双链DNA结合后荧光强度可增强25倍与双链RNA结合后荧光强度增强21倍这种特性使其能够检测到
λ DNA HindIII + EcoRI是一种常用的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它是通过将λ噬菌体DNA用HindIII和EcoRI两种限制性内切酶完全酶切后获得的,具有明确的片段大小分布。产品特性片段组成:λ DNA HindIII + EcoRI Marker由13条双链DNA条带组成,片段大小范围从125 bp到21,226 bp。即用型设计:已预混1×上样缓冲液,可直接用于凝胶电泳。稳定性:室温保存一个月带型无变化,但建议低温保存以防止核酸酶污染。使用方法电泳条件:凝胶浓度:建议使用0.5%-1.0%的琼脂糖凝胶。电泳缓冲液:1×TAE或0.5-1×TBE。电压:6-8 V/cm,电泳时间30-60分钟。热处理:使用前建议在65℃水浴中加热5分钟,然后在冰浴中冷却3分钟,以避免COS位点的片段结合。上样量:根据加样孔宽度,取2-5 µL加入凝胶加样孔中。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
RcView 吖啶橙核酸染料凭借其高效、安全和特异性强的特点,成为核酸染色实验中的理想选择。
在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,为研究人员提供了一个高效、防污染且便捷的一步法qPCR解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 UDG技术是该试剂盒的核心亮点之一。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。
在琼脂糖凝胶电泳中DL2000DNAMarker可作为分子量标准帮助研究人员快速判断DNA片段的长度
DNA Marker V是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成,条带大小分别为200 bp、400 bp、700 bp、1000 bp、1500 bp和2000 bp。其中,1000 bp条带的浓度较高(100 ng/5 µL),显示为加亮带,便于在电泳后快速定位。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 µL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取2-5 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。每1 mm × 1 mm的加样孔上样1 µL;如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件:凝胶浓度:建议使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-25分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。如果使用Goldview等染料,由于灵敏度较低,建议适当增加Marker的上样量。
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