溴酚蓝和二甲苯青FF作为示踪染料,能够在电泳过程中指示RNA的迁移位置。
10 mg/ml的溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)溶液是一种常用的核酸染料,广泛应用于分子生物学实验中,尤其是在DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳检测中。 EB是一种多环芳烃荧光小分子,能够嵌入核酸的碱基对之间。当EB与双链DNA(dsDNA)结合时,荧光强度会增强约25倍,与双链RNA(dsRNA)结合时,荧光强度增强约21倍。这种特性使得EB在低浓度下(如10 µg/ml)染色后无需脱色处理,即可在紫外光下清晰观察到核酸条带。 在使用10 mg/ml EB溶液进行电泳时,通常有两种染色方法: 电泳前染色:在制胶时加入EB,使其工作浓度达到0.5 µg/ml。例如,每100 ml的琼脂糖凝胶溶液中加入5-10 µL的10 mg/ml EB溶液,混匀后倒胶。 电泳后染色:将电泳后的凝胶浸泡在含有0.5 µg/ml EB的电泳缓冲液或水中,染色15-45分钟。 需要注意的是,EB具有较强的诱变性和毒性,操作时应佩戴手套和实验服,避免直接接触皮肤。此外,EB废液应按照实验室标准进行净化处理后再丢弃,以避免环境污染。
4S GelBlue 核酸染料是一种高灵敏度、低毒性、稳定的荧光核酸染色试剂。
Benzonase核酸酶残留检测试剂盒是一种用于检测生物制品中Benzonase核酸酶残留量的高灵敏度工具。该试剂盒基于荧光法或ELISA原理,能够快速、准确地检测样品中核酸酶的残留量,对于生物制品的质量控制至关重要。 产品特点 高灵敏度:能够检测到低至0.002 U(约0.003 ng)的Benzonase核酸酶残留。 适用范围广:不仅可以检测Benzonase核酸酶,还可检测其他多种核酸酶,如DNase I、T4 DNA聚合酶、T5外切酶等。 检测速度快:采用一步法检测,全程仅需约10-20分钟。 操作简便:无需特殊仪器,常规实验室操作即可完成。 检测原理 试剂盒利用荧光共振能量转移(FRET)技术,通过特定的DNA寡核苷酸探针进行检测。探针一端带有荧光基团,另一端带有淬灭基团。当探针被Benzonase切割后,荧光信号增强,从而实现对核酸酶活性的灵敏检测。 使用方法 试剂准备:将所有试剂组分及待测样本恢复至室温。 标准曲线设置:将Benzonase标准品稀释至不同浓度梯度,加入96孔板中。 检测体系设置:依次加入试剂盒各组分及样品,建议每个样品设置平行孔或复孔。
虽然 4S GelRed 无毒,但对皮肤和眼睛仍有轻微刺激性,实验时建议佩戴手套和口罩。
在分子生物学的研究中,长片段DNA的扩增一直是PCR技术的挑战之一。然而,随着Ultra-Long DNA Polymerase的出现,这一难题得到了有效解决。Ultra-Long DNA Polymerase以其卓越的长片段扩增能力和高保真性,成为了现代分子生物学实验中的强大工具。 Ultra-Long DNA Polymerase是一种专门针对长片段DNA扩增而设计的聚合酶。它结合了多种酶的特性,能够在单次反应中高效扩增长达40 kb甚至更长的DNA片段。这种能力使其在基因组学研究、全基因合成以及复杂基因组区域的分析中具有无可比拟的优势。例如,在研究大型基因或基因簇时,Ultra-Long DNA Polymerase能够提供完整的基因序列信息,避免因片段过短而导致的拼接错误。 除了长片段扩增能力外,Ultra-Long DNA Polymerase还具有高保真性。它通过内置的3'到5'外切酶活性,能够在DNA合成过程中纠正错误配对的碱基,从而显著提高扩增产物的准确性。
Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye)广泛应用于基因克隆、基因表达分析
4S Red Plus 核酸染色剂是一种高灵敏度、低毒性的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。 产品特性安全性高:4S Red Plus 是一种油性大分子,分子量约为1,000,无法穿透细胞膜进入细胞内,诱变性远小于EB。Ames测试结果显示,该染色剂的诱变性极低,几乎没有致癌性。灵敏度高:对核酸的迁移影响小于SYBR Green I,能够提供清晰的条带。稳定性好:具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加,无需等待溶液冷却。信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。操作简单:与EB的使用方法相似,无需脱色或冲洗。适用范围广:可选择凝胶染色法和泡染法;适用于琼脂糖凝胶或丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA、ssDNA或RNA染色。经济实惠:单次成本比银染和SYBR Green I低。使用方法胶染法(推荐方法):制备100 mL琼脂糖溶液,加热溶解后冷却至60-70℃。加入10 µL 4S Red Plus 核酸染色剂(10,000×)。轻柔混合(注意排去气泡)后铺胶。
热敏UDG在分子诊断和PCR实验中表现出色,尤其适用于需要严格控制污染的实验环境
Bst DNA Polymerase, Large Fragment 是一种来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)的重组酶,具有5′→3′ DNA聚合酶活性和强大的链置换能力,但缺乏5′→3′核酸外切酶活性。这种酶在等温扩增技术中表现出色,尤其适用于环介导等温扩增(LAMP)和滚环扩增(RCA)等应用。功能与特性链置换活性:Bst DNA Polymerase, Large Fragment 具有强大的链置换能力,能够在等温条件下高效扩增DNA。高耐盐性:该酶在高盐环境中表现出良好的活性,适合处理复杂的生物样本。 高灵敏度:能够在低浓度模板下实现高效的DNA扩增。热稳定性:最佳活性温度为65℃,可在60-70℃的温度范围内稳定工作。应用场景环介导等温扩增(LAMP):用于快速、灵敏的病原体检测和基因分析。滚环扩增(RCA):用于DNA的高效率扩增。高GC含量DNA测序:适用于高GC含量的DNA模板的测序。全基因组扩增(WGA):用于微量DNA模板的快速扩增。
SYBR Green I 10000×浓缩液应保存在-20℃避光环境中,避免反复冻融。
在生命科学领域,Taq DNA Polymerase犹如一颗璀璨的明珠,闪耀着独特的光芒。它是一种耐热的DNA聚合酶,最初是从一种嗜热细菌——栖热水生菌(Thermus aquaticus)中分离出来的。这种细菌生活在高温的温泉环境中,而Taq酶也因此具备了在高温下稳定工作的能力,这使得它在分子生物学实验中扮演了不可或缺的角色。 Taq DNA Polymerase的主要功能是催化DNA的合成。在聚合酶链式反应(PCR)中,Taq酶的作用尤为关键。PCR是一种用于快速扩增特定DNA片段的技术,它通过反复的变性、退火和延伸三个步骤来实现DNA的指数级扩增。在变性阶段,DNA双链被高温分离成单链;退火阶段,引物与模板DNA结合;而在延伸阶段,Taq酶便大显身手。它能够以单链DNA为模板,从引物的3'端开始,按照碱基互补配对原则,将一个个脱氧核苷酸添加到新链上,从而合成与模板互补的DNA链。由于Taq酶在高温下仍能保持活性,这使得PCR反应可以在较高的温度下进行,大大提高了反应的特异性和效率。
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