3'-羟基攻击5'-磷酸末端,形成新的磷酸二酯键,从而完成DNA片段的连接。
在生物实验中,核酸染色是检测DNA和RNA的重要步骤,但传统染料如溴化乙锭(EB)具有致癌性,对实验人员和环境存在潜在危害。4S Green Plus 无毒核酸染料作为一种新型的EB替代品,为科研人员提供了一种安全、高效且环保的选择。4S Green Plus 是一种无毒、非致癌的核酸染料,其灵敏度与EB相当,能够检测到低浓度的核酸分子。它在295 nm和490 nm处具有荧光激发最大值,与结合DNA的EB荧光激发点相近,可在紫外灯或蓝光LED下清晰观察DNA条带。这种染料不仅安全性高,还具有高特异性和荧光稳定性,不会与其他细胞成分结合,且在实验过程中荧光信号稳定。4S Green Plus 的使用方法灵活,既可用于凝胶前染色,也可用于凝胶后染色。在凝胶前染色时,将染料加入冷却至50-60℃的琼脂糖溶液中;在凝胶后染色时,每100 mL染色溶液中加入20-30 μL染料,染色30分钟后脱色即可。此外,4S Green Plus 适合用于琼脂糖凝胶中的双链DNA、单链DNA和RNA的检测。
通过对比不同GC含量和引物Tm值的体系,该试剂盒在多种复杂条件下均能保持高特异性,生成清晰的扩增曲线
PBCV-1 DNA连接酶(也称为SplintR连接酶或Chorella病毒DNA连接酶)是一种ATP依赖的DNA连接酶,能够高效催化与互补RNA单链配对的两条相邻DNA单链的连接反应。这种酶在连接过程中需要一条互补的RNA链作为“夹板”或“支架”,以固定两条DNA单链,从而实现高效的连接。 工作原理 PBCV-1 DNA连接酶的连接反应依赖于ATP作为能量来源,并且对RNA“夹板”固定的DNA底物具有极高的亲和力(表观Km值为1 nM),这使得它能够在复杂混合物中检测到亚纳摩尔级别的特定RNA。该酶对连接点处的碱基对组合具有一定的耐受性,但某些碱基对组合(如dCG/R或dG/C)可能会抑制酶活性。 应用优势 PBCV-1 DNA连接酶的连接活性远优于传统的T4 DNA连接酶,尤其在高灵敏度RNA检测方面表现出色。它被广泛应用于以下领域: 高灵敏度RNA检测:可用于检测miRNA、mRNA和非编码RNA的定性或定量分析,以及单核苷酸多态性(SNP)和可变剪接的检测。 原位测序:通过连接挂锁探针形成环状模板,用于原位滚环扩增(RCA),从而实现高通量检测。
GoldenView 吖啶橙核酸染料与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当。
CTP(胞苷三磷酸)是一种重要的核苷酸,广泛应用于分子生物学和生物化学实验中。100 mM CTP溶液(无核酸酶)是一种高纯度、无污染的试剂,适用于多种实验需求。 产品特点 高纯度:纯度≥99%,经过HPLC验证。 无核酸酶污染:经测试不含DNase、RNase、磷酸酶和蛋白酶,确保RNA和DNA的完整性。 稳定性高:在pH 7.3-7.5的条件下,CTP溶液极为稳定,可在-20℃保存长达2年。 用途广泛:适用于体外转录、RNA合成与扩增、siRNA合成等。 应用场景 体外转录:用于SP6、T3和T7 RNA聚合酶的反应,生成高质量的RNA。 RNA合成与扩增:提供能量支持,确保反应顺利进行。 siRNA合成:用于合成小干扰RNA,用于基因沉默。 使用注意事项 避免反复冻融:反复冻融会降低CTP的效率。 低温操作:使用时需在冰上操作,并在使用后立即放回-20℃保存。 防止污染:实验过程中需戴一次性手套,避免RNase污染。 100 mM CTP溶液(无核酸酶)凭借其高纯度、无污染和稳定性,已成为分子生物学实验中的重要试剂,特别适合需要高纯度和高效率的实验。
4S Green Plus 无毒核酸染料作为一种新型的EB替代品,为科研人员提供了一种安全。
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于基因表达分析、病原体检测和基因拷贝数变异分析等领域。然而,实验室中的PCR产物污染可能导致假阳性结果,严重影响实验的可靠性。Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,提供了一种高效、防污染的qPCR解决方案,确保实验结果的准确性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus)的核心优势在于其整合了UDG技术。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。而在高温变性步骤中(通常95℃),UDG会迅速失活,不会影响后续的qPCR反应。这种机制有效减少了假阳性结果,提高了实验的可靠性。 产品特点 高效防污染:UDG技术能够有效降解含有尿嘧啶的PCR产物,防止实验室中的残留产物污染,从而减少假阳性结果。
此外,该试剂盒还支持多片段克隆,能够在一次反应中将多个片段同时插入到载体中。
DNA Marker IV是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成,条带大小分别为500 bp、1000 bp、2000 bp、3500 bp、5500 bp和7000 bp。其中,2000 bp条带的浓度最高,约为100 ng/5 µL,其余条带浓度约为50 ng/5 µL。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取3-6 µL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰锐利,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取3-6 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。如果加样孔宽度小于5 mm,每次取5 µL即可;如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件:凝胶浓度:建议使用1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-30分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
螯合二价金属离子,防止核酸被核酸酶降解,同时维持电泳过程中的缓冲环境。
甲基汞凝胶电泳缓冲液(10×)是一种专为甲基氢氧化汞电泳设计的高浓度缓冲液,广泛应用于核酸电泳实验中。它主要由硼酸、硼酸钠和硫酸钠组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:由500 mM硼酸、50 mM硼酸钠和硫酸钠组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×工作液含有50 mM硼酸、5 mM硼酸钠和微量硫酸钠,pH值约为8.1。高效分离:适用于甲基氢氧化汞电泳,能够提供清晰的条带。保存条件:室温保存,有效期为12个月。使用方法稀释:将10×甲基汞凝胶电泳缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释10倍,制备1×工作液。制备凝胶:将琼脂糖溶解于1×缓冲液中,加热熔化,冷却至55℃后加入甲基氢氧化汞,使其终浓度为5 mM。电泳操作:将样品加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项水质要求:使用的蒸馏水或去离子水应尽量少含金属离子,以避免影响电泳效果。个人防护:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。保存条件:室温保存,开封后建议尽快使用。
上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长!