采用新一代抗体修饰的TaqDNA聚合酶和一步法专用温启动逆转录酶,结合优化的缓冲液体系显著提高了灵敏
在分子生物学实验中,PCR技术是基因扩增的核心手段,而Hot-Start Taq Master Mix (2×)(无染料)则是这一技术的升级版,为实验人员提供了一个高效、精准且便捷的PCR反应体系。 Hot-Start Taq Master Mix (2×)是一种预配制的双倍浓度PCR反应混合液,专为提高PCR反应的特异性和灵敏度而设计。它结合了Hot-Start技术与Taq DNA聚合酶的优势,同时省略了染料成分,为后续的实验操作提供了更大的灵活性。 Hot-Start技术是该Master Mix的核心亮点。传统Taq酶在室温下即可表现出活性,容易导致引物的非特异性结合和扩增产物的背景噪声。而Hot-Start Taq Master Mix通过化学修饰或抗体结合的方式,使Taq酶在室温下处于“关闭”状态,只有在高温变性步骤(通常在95℃)时才会被激活。这种机制有效避免了非特异性扩增,尤其适用于复杂模板或低丰度目标基因的扩增。
dNTP Mix是不可或缺的关键试剂,广泛应用于PCR扩增、cDNA合成、DNA测序、引物延伸反应等
在分子生物学和生物医学研究中,逆转录定量PCR(RT-qPCR)是一种广泛使用的高灵敏度和高特异性的基因表达分析技术。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit作为一种一体化的试剂盒,为研究人员提供了一种高效、便捷的一步法RT-qPCR解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 产品特点 高效逆转录酶:该试剂盒含有高效的逆转录酶,能够在短时间内将RNA转录为cDNA,确保逆转录反应的高效进行。 优化的反应体系:试剂盒中的反应体系经过优化,包含SYBR Green荧光染料、热启动Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺等所有必需成分,确保了qPCR反应的高效扩增。
因此,该缓冲液不仅适用于常规的DNA电泳,还特别适合用于终止酶促反应后的样品分析。
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于基因表达分析、病原体检测和基因拷贝数变异分析等领域。然而,实验室中的PCR产物污染可能导致假阳性结果,严重影响实验的可靠性。此外,某些qPCR仪器(如部分ABI系列)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)通过整合低浓度ROX校正功能和UDG防污染技术,提供了一种高效、精准且可靠的qPCR解决方案。 低浓度ROX与UDG技术的双重优势 Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)结合了两种关键技术:低浓度ROX参考染料和UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)防污染系统。低浓度ROX能够有效校正孔间荧光信号的差异,确保荧光定量的准确性,特别适用于需要低浓度ROX的qPCR仪器(如部分ABI系列)。而UDG技术则通过降解含有尿嘧啶的DNA,防止实验室中的PCR产物污染,从而减少假阳性结果,提高实验的可靠性。
6×DNA 在不同浓度的琼脂糖凝胶中,溴酚蓝和二甲苯青的迁移速率稳定,为实验提供可靠的参考
在分子生物学研究中,长片段DNA扩增是许多实验的关键步骤,但传统PCR方法在扩增较长片段时常常面临效率低、特异性差等问题。Ultra-Long Master Mix (2×) (Without Dye)的出现,为这一难题提供了高效的解决方案。 Ultra-Long Master Mix (2×) (Without Dye)是一种专为长片段DNA扩增设计的预混反应体系。它以Ultra-Long DNA Polymerase为核心,这种聚合酶融合了多种酶的特性,能够在单次反应中高效扩增长达40 kb甚至更长的DNA片段。这种能力使其在基因组学研究、全基因合成以及复杂基因组区域的分析中具有无可比拟的优势。 该Master Mix的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和水加入其中,即可快速配制好反应体系。这种预混液不仅简化了操作流程,还减少了人为误差,确保了反应体系的均一性和稳定性。此外,无染料配方为后续实验提供了更大的灵活性。实验人员可以根据需要选择是否添加染料,或者直接用于下游应用,如克隆、测序或无染料的凝胶电泳分析。
通常每次取5 µL加入凝胶加样孔中。如果加样孔较宽,可适当增加上样量。
DNA尿素加样缓冲液(2×)是一种专为变性核酸电泳设计的2倍浓缩上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由Tris、EDTA、甘油、尿素等组成,能够有效解除DNA的二级结构,保持DNA的单链构型。产品特性成分:主要由Tris、EDTA、甘油、尿素等组成,不含溴酚蓝。使用特点:加样后易下沉,便于电泳操作。保存条件:-20℃避光保存,有效期为12个月。用途:仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他非科研用途。使用方法稀释:将2×DNA尿素加样缓冲液与待测核酸样品液按照1:1比例稀释。变性处理:将混合后的样品在95°C水浴中处理5分钟,然后在冰上冷却。电泳操作:将处理后的样品直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。DNA尿素加样缓冲液(2×)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性,成为变性核酸电泳实验中的理想选择。
在琼脂糖凝胶电泳中,GoldenView 与核酸结合后能产生强烈的荧光信号,其灵敏度与溴化乙锭相当
在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的技术,用于分离和分析DNA片段。而6×DNA Loading Buffer则是这一实验中不可或缺的重要试剂。 6×DNA Loading Buffer是一种六倍浓缩的上样缓冲液,主要用于DNA凝胶电泳。它含有甘油、EDTA、溴酚蓝和二甲苯青FF等成分。其中,甘油可以增加样品的密度,使样品沉入凝胶加样孔中,防止样品漂浮;EDTA则用于螯合金属离子,防止DNA降解。溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,分别指示电泳的进程,帮助实验者判断电泳是否达到最佳分离效果。 使用6×DNA Loading Buffer时,通常按照1:5(Loading Buffer:DNA样品)的比例混合。例如,对于5μL的DNA样品,加入1μL的6×Loading Buffer,混匀后即可加样。这种缓冲液适用于多种浓度的琼脂糖凝胶,溴酚蓝在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶中的迁移率分别与1Kb、0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同。
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