Taq PCR Master Mix (2×) (With Dye)广泛应用于基因克隆、基因表达分析
DNA Marker IV是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成,条带大小分别为500 bp、1000 bp、2000 bp、3500 bp、5500 bp和7000 bp。其中,2000 bp条带的浓度最高,约为100 ng/5 µL,其余条带浓度约为50 ng/5 µL。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取3-6 µL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰锐利,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取3-6 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。如果加样孔宽度小于5 mm,每次取5 µL即可;如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件:凝胶浓度:建议使用1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-30分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
在琼脂糖凝胶电泳中,GoldenView 与核酸结合后能产生强烈的荧光信号,其灵敏度与溴化乙锭相当
Tris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE)是一种广泛应用于核酸电泳的高浓度缓冲液,特别适用于DNA和RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳。它由三羟甲基氨基甲烷(Tris)、硼酸和乙二胺四乙酸(EDTA)组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:主要由450 mM Tris-硼酸和10 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释5倍后得到的0.5×TBE工作液含有45 mM Tris-硼酸和1 mM EDTA,pH值约为8.0。缓冲能力强:适合较长时间电泳,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将5×TBE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释5倍,制备0.5×工作液。电泳操作:将稀释后的0.5×TBE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。
在模拟污染实验中,UDG防污染系统能够有效降解含尿嘧啶的DNA污染避免了假阳性结果的出现确保了可靠性
pA-Tn5转座酶是一种新型融合酶,由高活性的Tn5转座酶与Protein A融合而成。它兼具Tn5转座酶的高效DNA切割能力和Protein A的抗体结合能力,广泛应用于CUT&Tag(Cleavage Under Targets and Tagmentation)技术,用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。 工作原理 pA-Tn5转座酶通过Protein A与特异性抗体结合,被引导至目标蛋白所在的染色质区域。在该区域,Tn5转座酶能够高效切割DNA,并在切割位点插入测序接头。随后,通过PCR扩增,生成可用于高通量测序的文库。 应用场景 CUT&Tag技术:用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用,如转录因子结合位点、组蛋白修饰分布等。与传统的ChIP-Seq相比,CUT&Tag具有更高的信噪比、更好的可重复性、更短的实验周期(1天完成从细胞到文库构建),且所需细胞量更少。 高通量测序文库构建:pA-Tn5转座酶能够快速片段化DNA,并直接连接测序接头,简化了文库构建的步骤。 单细胞测序:可用于单细胞基因组学研究,通过切割和标记单细胞中的DNA,实现高通量测序。
Ultra-Long DNA Polymerase在扩增超长片段时表现出色,能够显著提高产物的产量
phi29 DNA Polymerase 是一种来源于 Bacillus subtilis 噬菌体 phi29 的重组酶,经过基因工程改造后,具有卓越的链置换和持续合成能力。它能够在等温条件下高效扩增DNA,生成长达70 kb的DNA片段。 特性与优势 高持续合成能力:phi29 DNA Polymerase 可以连续合成超过70 kb的DNA片段,无需从模板上解离。 高保真性:具有3′→5′外切酶校正活性,保真性比Taq DNA Polymerase高100倍。 链置换活性:能够高效置换DNA链,适合滚环扩增(RCA)和多重置换扩增(MDA)。 温和反应条件:反应温度通常为37-42℃,适合等温扩增。 应用场景 全基因组扩增(WGA):用于单细胞测序、病原微生物检测和宏基因组研究。 滚环扩增(RCA):生成周期性DNA纳米模板,适用于测序模板制备。 多重置换扩增(MDA):用于无偏扩增全基因组。 高GC含量模板扩增:在NGS测序中,能够提升高GC含量和复杂模板的扩增效率。 使用方法 储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。 反应条件:37-42℃孵育1-3小时,65℃加热10分钟失活。
总之,4S Green Plus 无毒核酸染料以其安全、高效和环保的特点。
50×TAE液体是一种高浓度的缓冲液,广泛应用于核酸电泳实验中,特别是在琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳中。TAE是Tris-Acetate-EDTA缓冲液的缩写,其主要成分包括三羟甲基氨基甲烷(Tris base)、乙酸(acetic acid)和乙二胺四乙酸(EDTA)。产品特性高效分离:TAE缓冲液在电泳大于13 kb的DNA片段时,能够取得更好的分离效果。迁移率快:双链线状DNA在TAE缓冲液中的迁移率较其他缓冲液快约10%。适用范围广:适用于基因组DNA、大分子超螺旋DNA、大于1500 bp的RNA和DNA的电泳分离。即用型设计:50×TAE液体为浓缩液,使用时只需用去离子水稀释50倍即可。使用方法配制1×TAE工作液:取20 mL的50×TAE液体,加入980 mL去离子水,充分混匀。电泳条件:凝胶浓度:通常使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。 电泳电压:建议4-10 V/cm,电泳时间根据片段大小调整。保存条件:室温保存,有效期一般为12个月。注意事项沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。
Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。
在分子生物学实验中,核酸电泳是检测核酸片段大小和纯度的关键技术之一。3×甲酰胺凝胶上样缓冲液作为一种高效的辅助试剂,为核酸电泳提供了重要的支持。组成成分3×甲酰胺凝胶上样缓冲液的主要成分包括:甲酰胺(Formamide):高浓度的甲酰胺能够有效变性核酸,使其保持单链状态,避免核酸在电泳过程中形成二级结构,从而实现更准确的分子量测定。二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 溴酚(Bromophenol Blue):这两种染料作为示踪剂,可帮助观察电泳的进程。二甲苯青迁移速度较慢,适用于较大片段的示踪;溴酚蓝迁移速度较快,适用于较小片段的示踪。EDTA(乙二胺四乙酸):螯合二价金属离子,防止核酸被核酸酶降解,同时维持电泳过程中的缓冲环境。使用方法样品混合:将核酸样品与3×甲酰胺凝胶上样缓冲液按体积比2:1混合,例如,5 μL核酸样品加入2.5 μL缓冲液。变性处理:混合后的样品在70℃加热5-10分钟,使核酸充分变性。加热后立即置于冰上冷却,以防止核酸重新折叠。电泳上样:将处理后的样品加入凝胶的加样孔中,进行电泳。
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