Phusion DNA Polymerase适用于多种PCR应用,包括常规PCR、长片段扩增
在分子生物学实验中,DNA聚合酶的选择对于PCR反应的准确性和效率至关重要。Phusion DNA Polymerase以其卓越的高保真性和强大的扩增能力,成为了许多科研人员在高精度基因扩增实验中的首选酶。 Phusion DNA Polymerase是一种融合了多种酶活性的新型聚合酶,它结合了Pfu DNA聚合酶的高保真性和Taq DNA聚合酶的高效合成能力。这种独特的酶组合使得Phusion酶在DNA合成过程中能够同时保证高准确性和快速扩增。其保真度比普通Taq酶高出约50倍,甚至比Pfu酶更高,这使得它在长片段DNA扩增和需要高准确性的基因克隆实验中表现出色。 Phusion DNA Polymerase的另一个显著特点是其强大的扩增能力。它能够高效扩增长达10 kb的DNA片段,这对于许多需要扩增长片段的研究项目来说是一个巨大的优势。例如,在基因组学研究中,Phusion酶能够准确地扩增复杂的基因组区域,为后续的测序和功能分析提供高质量的模板。
通过对比不同GC含量和引物Tm值的体系,该试剂盒在多种复杂条件下均能保持高特异性,生成清晰的扩增曲线
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,准确性和重复性是实验成功的关键。然而,实验室中的PCR产物污染可能导致假阳性结果,严重影响实验的可靠性。SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,提供了一种高效、防污染的qPCR解决方案,确保实验结果的准确性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus)的核心优势在于其整合了UDG技术。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。而在高温变性步骤中(通常95℃),UDG会迅速失活,不会影响后续的qPCR反应。 产品特点 高效防污染:UDG技术能够有效降解含有尿嘧啶的PCR产物,防止实验室中的残留产物污染,从而减少假阳性结果。
已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 µL进行电泳,无需额外处理。
在分子生物学实验中,6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 是一种常用的试剂,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,帮助核酸样品沉入凝胶加样孔并提供电泳迁移的示踪功能。 组成成分及作用6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 的主要成分包括:二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 溴酚蓝(Bromophenol Blue):这两种染料在电泳过程中作为示踪剂,帮助观察电泳的进程。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,使样品能够沉入凝胶加样孔中。Tris-HCl 和 EDTA:Tris-HCl 提供稳定的缓冲环境,而 EDTA 可以螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。使用方法混合比例:通常将 1 μL 的 6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 与 5 μL 的核酸样品混合。电泳操作:混合后的样品可以直接加入琼脂糖凝胶的加样孔中,通过观察染料的迁移情况来判断电泳是否完成。特点与优势双色示踪:二甲苯青和溴酚蓝的迁移速度不同,分别对应不同大小的 DNA 片段,可提供更准确的电泳进程指示。
5×RNA Loading Buffer适用于多种RNA电泳实验,包括非变性琼脂糖凝胶电泳和变性琼脂
T5核酸外切酶(T5 Exonuclease)是一种沿5'→3'方向降解DNA的核酸外切酶,能够从DNA的5'末端或线性/环状双链DNA的缺口(gap)或切刻(nick)处起始消化。它对超螺旋双链DNA无作用,并且具有单链DNA核酸内切酶活性。 特性与应用 高效降解:T5核酸外切酶能够高效降解线性单链和双链DNA,以及切刻的质粒DNA。 无缝克隆:在无缝克隆技术中,T5核酸外切酶用于从DNA片段的5'端切割一条链,产生3'突出末端,促进互补片段的退火配对,进而通过DNA聚合酶填补缺口,最后由DNA连接酶修复缺刻,形成完整的环状质粒。 Gibson组装:T5核酸外切酶在Gibson组装中发挥关键作用,通过从DNA片段的5'末端开始消化,产生互补的单链3'末端,促进片段退火和连接。 去除污染:该酶可用于去除碱裂解质粒提取过程中产生的变性DNA,提高DNA克隆效率。 使用方法 储存条件:T5核酸外切酶通常保存于-20℃,有效期可达3年。 反应条件:在37℃下反应30分钟,加入至少11 mM EDTA或含有SDS的DNA Loading Buffer终止反应。
虽然 4S GelRed 无毒,但对皮肤和眼睛仍有轻微刺激性,实验时建议佩戴手套和口罩。
在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的分析技术,用于分离和检测DNA片段。而10×DNA Loading Buffer则是这一实验中不可或缺的重要试剂。它是一种10倍浓缩的上样缓冲液,专门用于DNA凝胶电泳,能够帮助DNA样品顺利沉入凝胶加样孔中,并在电泳过程中提供清晰的指示。 10×DNA Loading Buffer的主要成分包括甘油、溴酚蓝、二甲苯青FF和SDS。甘油的作用是增加样品的密度,确保DNA样品能够沉入凝胶孔中,防止样品漂浮。溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,分别指示电泳的进程,帮助实验者判断电泳是否达到最佳分离效果。在1%琼脂糖凝胶中,二甲苯青FF的迁移速率与4000个碱基对的DNA片段大致相同,而溴酚蓝的迁移速率则与约500个碱基对的DNA片段相同。 使用10×DNA Loading Buffer时,通常按照1:9(上样缓冲液:DNA样品)的比例混合。例如,对于9μL的DNA样品,加入1μL的10×DNA Loading Buffer,混匀后即可上样。这种缓冲液适用于多种类型的DNA样品,包括PCR产物、质粒DNA和基因组DNA等。
Ultra-Long DNA Polymerase在扩增超长片段时表现出色,能够显著提高产物的产量
MOPS电泳缓冲液(1×, RNase free)是一种专为RNA电泳设计的缓冲液,经过RNase-free处理,能够有效避免RNA降解,确保电泳结果的可靠性。产品特性成分:主要由MOPS、乙酸钠和EDTA组成。缓冲能力:在pH 6.5 - 7.9范围内具有良好的缓冲能力,适用于中性pH条件下的RNA电泳。无RNase污染:经过RNase-free处理,确保无RNase污染,适用于RNA电泳。稳定性高:室温避光保存,有效期长达1年。使用方法直接使用:1×浓度,无需稀释,直接使用。电泳操作:将配制好的1×MOPS缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的RNA染料(如EB或Goldview)染色。 在紫外灯下观察RNA条带。保存与注意事项保存条件:室温避光保存,开封后建议尽快使用。避免RNase污染:使用时需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。溶液变色:溶液见光后易变黄,淡黄色不影响使用,但颜色过深建议停止使用。
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