DNAMarkerIplus在4℃条件下可稳定保存3个月-20℃下可长期保存这种稳定性确保可靠性
在分子生物学和生物技术领域,末端脱氧核糖核酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)是一种极为重要的酶,以其独特的功能在DNA末端修饰和标记中发挥着关键作用。TdT能够将脱氧核苷酸(dNTPs)添加到DNA的3'末端,这一特性使其成为DNA研究中的“艺术家”。 末端脱氧核糖核酸转移酶的特性 末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT)是一种依赖于DNA末端的酶,能够将脱氧核苷酸(dNTPs)添加到DNA链的3'末端。与大多数DNA聚合酶不同,TdT不需要模板来指导核苷酸的添加,这使得它能够在DNA末端添加任意序列的核苷酸。TdT的活性不依赖于Mg²⁺离子,而是需要Co²⁺或Mn²⁺离子来激活。 广泛的应用 TdT在分子生物学研究中具有广泛的应用。例如,在DNA末端标记中,TdT被用于添加放射性或荧光标记的核苷酸,从而生成用于杂交实验的标记探针。在DNA测序中,TdT可以用于添加特定的核苷酸序列,帮助确定DNA的末端结构。此外,TdT还被用于DNA片段的连接和修复,通过在DNA末端添加特定的核苷酸序列,促进DNA片段之间的连接。
dNTP Mix是一种由 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP 组成的等摩尔混合溶液
T4 DNA聚合酶是一种来源于T4噬菌体的酶,具有独特的酶活性和广泛的应用价值。它能够催化DNA的5'→3'方向合成,同时具备3'→5'核酸外切酶活性,但不具有5'→3'核酸外切酶活性。这种酶在分子生物学实验中被广泛应用于多种场景。 工作原理 T4 DNA聚合酶的活性依赖于模板和引物的存在。它通过识别单链DNA模板上的引物,从5'端向3'端合成新的DNA链。此外,它还具有3'→5'外切酶活性,能够在没有dNTPs的情况下,按3'→5'方向降解双链DNA。这种外切酶活性在存在特定dNTP时会被抑制,例如当反应体系中仅存在dGTP时,酶会在遇到G碱基时停止降解。 应用 T4 DNA聚合酶在分子克隆中具有重要应用。例如,在In-Fusion克隆技术中,它利用3'→5'外切酶活性生成单链5'突出端,通过互补序列的退火实现DNA片段的无缝连接。此外,它还被用于DNA末端修饰,如将黏性末端转换为平末端,或在3'末端添加特定核苷酸。 在高通量测序(NGS)中,T4 DNA聚合酶用于文库构建,通过平滑DNA末端或添加特定序列,提高测序效率。它还被用于位点特异性突变、DNA末端标记等应用。
例如,一些研究发现,Exendin-4能够改善心血管功能,减少心血管事件的发生。
在人体复杂的生理机制中,M-CSF(巨噬细胞集落刺激因子)扮演着极为关键的角色。它是一种主要针对单核 - 巨噬细胞系造血细胞的细胞因子,人源的 M-CSF 对于维持正常的血液系统功能至关重要。 M-CSF 能够促进单核 - 巨噬细胞的增殖、分化和成熟。在骨髓中,造血干细胞分化为单核 - 巨噬细胞系的过程中,M-CSF 就像一位精准的指挥官,引导着细胞沿着正确的路径发展。它刺激这些细胞生长,使它们能够源源不断地补充到血液中,从而保证血液中单核细胞和巨噬细胞的数量维持在一个相对稳定的水平。单核细胞进入外周组织后会分化为巨噬细胞,这些细胞在免疫防御方面发挥着巨大作用,它们能够吞噬和消灭病原体、清除体内损伤和死亡的细胞,是人体免疫系统的第一道防线。 此外,M-CSF 对于炎症反应的调节也不可或缺。在炎症部位,它能够激活巨噬细胞,使其释放出一系列的细胞因子和炎症介质,从而增强免疫反应,帮助身体更快地清除感染源和修复受损组织。然而,M-CSF 的水平也需要严格调控,因为如果其过度激活巨噬细胞,可能会导致过度的炎症反应,引发一系列疾病,如自身免疫性疾病等。
IGF-I 水平的异常升高可能与某些癌症的发生有关,因为 IGF-I 可以促进癌细胞的增殖和存活。
组织激肽释放酶-1(Kallikrein-1,KLK1)是一种丝氨酸蛋白酶,属于激肽释放酶家族。它在人体的多种生理过程中发挥着关键作用,包括调节血压、炎症反应和组织修复。Kallikrein-1通过水解激肽原生成激肽,从而调节血管舒张和血压。此外,它还参与调节炎症反应和组织修复过程。 Kallikrein-1的功能 Kallikrein-1的主要功能是通过水解激肽原生成血管活性肽,如缓激肽。缓激肽能够引起血管舒张,增加血管通透性,从而调节血压。这一机制在维持心血管系统的正常功能中至关重要。此外,Kallikrein-1还能够通过其蛋白酶活性,调节炎症反应和组织修复过程。在炎症部位,Kallikrein-1能够促进炎症介质的释放,增强免疫细胞的浸润,从而加速炎症反应的进程。 重组Kallikrein-1的制备 在生物技术领域,重组Kallikrein-1的制备和应用逐渐受到关注。通过基因工程技术,科学家们可以在大肠杆菌或其他宿主细胞中表达带有His标签的Kallikrein-1(Kallikrein-1, His)。His标签是一种多组氨酸序列,可以用于通过金属螯合层析法纯化重组蛋白。
添加了红色和黄色两种电泳指示染料不会削弱DNA在紫外灯下的荧光效果相比传统染料如溴酚蓝具有更好的使用
磁珠法mRNA纯化试剂盒是一种基于磁珠分离技术的高效工具,广泛应用于从总RNA中快速纯化mRNA。该试剂盒利用磁珠表面的Oligo(dT)序列与mRNA的poly(A)尾特异性结合,通过磁场分离和洗涤步骤,最终获得高纯度的mRNA。 工作原理 磁珠法mRNA纯化试剂盒的核心是磁珠表面修饰的Oligo(dT)序列。这些序列能够特异性结合mRNA的poly(A)尾,通过磁力作用实现快速分离。具体步骤包括: 磁珠结合:将总RNA与Oligo(dT)磁珠混合,使磁珠上的Oligo(dT)与mRNA的poly(A)尾结合。 磁力分离:通过磁力架将磁珠与溶液分离,去除未结合的杂质。 洗涤:用洗涤缓冲液去除残留杂质。 洗脱:用洗脱液将mRNA从磁珠上洗脱下来。 优势 高纯度:纯化后的mRNA纯度高,适合多种下游实验,如RT-qPCR、高通量测序等。 快速高效:整个纯化过程通常在15分钟内完成。 操作简便:所有操作均在同一个离心管中完成,无需复杂设备。 适用范围广:适用于动物、植物、细菌等多种生物样本。 注意事项 磁珠保存:磁珠应避免冷冻或干燥,使用前需恢复至室温并充分混匀。
Tris-HCl 提供稳定的缓冲环境,而 EDTA 可以螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解
成纤维细胞生长因子13(FGF-13)是FGF家族中的一员,属于FGF11亚家族。它是一种胞内非分泌型蛋白,主要在神经系统中发挥作用,调节神经元的极化、迁移和微管的稳定性。 神经系统中的关键角色 FGF-13在大脑皮层和海马体的神经元极化和迁移中起着至关重要的作用。它通过与微管蛋白结合,参与微管的聚合和稳定,对轴突和前导过程分支施加负调节,这对于神经元的正常发育至关重要。此外,FGF-13还调节电压门控钠通道的运输和功能,影响特定钠通道亚型的活性。 与疾病的关联 FGF-13的异常表达与多种疾病相关。在神经系统中,FGF-13的功能异常可能导致智力障碍和运动协调问题。此外,FGF-13在肥胖相关代谢紊乱中的作用也引起了研究者的关注。研究表明,FGF-13在肥胖小鼠和人类的脂肪组织中显著上调,与血糖指标呈正相关,提示其作为代谢紊乱标志物的潜力。 在代谢健康中的新发现 最近的研究揭示了FGF-13在肥胖相关代谢紊乱中的新角色。FGF-13通过破坏脂肪细胞线粒体功能,削弱脂肪细胞的能量代谢能力,从而导致全身代谢紊乱。这一发现为代谢疾病的治疗提供了新的靶点。
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