RcView 吖啶橙核酸染料的使用方法与溴化乙锭(EB)相同,操作简便。
在分子生物学和生物医学研究中,逆转录定量PCR(RT-qPCR)是一种广泛使用的高灵敏度和高特异性的基因表达分析技术。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit作为一种一体化的试剂盒,为研究人员提供了一种高效、便捷的一步法RT-qPCR解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 产品特点 高效逆转录酶:该试剂盒含有高效的逆转录酶,能够在短时间内将RNA转录为cDNA,确保逆转录反应的高效进行。 优化的反应体系:试剂盒中的反应体系经过优化,包含SYBR Green荧光染料、热启动Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺等所有必需成分,确保了qPCR反应的高效扩增。
在分子生物学实验中,RNA凝胶电泳是一种常用的检测手段,用于分析RNA的完整性。
在分子诊断和临床研究中,直接从血液样本中进行PCR扩增是快速检测病原体、基因突变和遗传疾病的关键技术。Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)凭借其独特的配方和高效性能,为直接从血液样本中进行PCR扩增提供了强大的支持。 Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)是一种专为直接从血液样本进行PCR反应而设计的预混液。它能够有效去除血液中的抑制物,如血红蛋白、胆红素和抗凝剂等,这些成分通常会干扰PCR反应的进行。通过优化的反应缓冲液和特殊的酶系统,该Master Mix能够直接从全血、血清或血浆中扩增目标DNA,无需复杂的样本前处理步骤,大大节省了时间和人力成本。 该Master Mix的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA(直接从血液样本中提取)、引物和水加入其中,即可快速配制好反应体系。这种预混液不仅简化了操作流程,还减少了人为误差,确保了反应体系的均一性和稳定性。此外,无染料配方为后续实验提供了更大的灵活性。
Taq DNA Polymerase是一种源自嗜热菌的耐热性DNA聚合酶。
Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE)是一种广泛应用于核酸电泳的高浓度缓冲液,特别适用于琼脂糖凝胶电泳。它由三羟甲基氨基甲烷(Tris)、乙酸和乙二胺四乙酸(EDTA)组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:主要由2M Tris-acetate和50 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释50倍后的1×TAE工作液含有40 mM Tris-acetate和1 mM EDTA,pH值约为8.0。高效分离:特别适合分离大于13 kb的DNA片段,能够提供更好的分离效果。适用范围广:适用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳,尤其在回收DNA片段时表现优异。使用方法稀释:将50×TAE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释50倍,制备1×工作液。电泳:将稀释后的1×TAE缓冲液加入电泳槽中,确保完全覆盖凝胶。根据实验需求调整电泳电压和时间。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色,在紫外灯下观察核酸条带。保存与注意事项保存条件:室温保存,有效期为1年。分装建议:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。
Pfu酶能够在95°C的高温下保持活性,适用于PCR反应中的高温变性步骤,已成为分子生物学实验中工具
在分子生物学实验中,长片段DNA的扩增一直是PCR技术的重要挑战。Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)凭借其卓越的长片段扩增能力和预混染料的便捷性,成为了这一领域的理想选择。 Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)是一种专为长片段DNA扩增设计的预混反应体系,其核心成分为Ultra-Long DNA Polymerase。这种聚合酶融合了多种酶的特性,能够在单次反应中高效扩增长达40 kb甚至更长的DNA片段。这种能力使其在基因组学研究、全基因合成以及复杂基因组区域的分析中具有无可比拟的优势。 与无染料版本不同,Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)在配方中加入了预混染料。这种设计使得实验人员在完成PCR反应后可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液。预混染料不仅节省了操作步骤,还减少了因手动添加缓冲液而导致的误差,提高了实验的重复性和可靠性。此外,染料的加入也便于实验人员在电泳过程中实时观察扩增产物的迁移情况,从而更直观地评估PCR反应的效果。
DL2000 Plus在正常使用条件下,可在室温下稳定存放,不会出现条带降解或弥散现象
T7 Endonuclease I(T7EI)是一种来源于T7噬菌体的核酸内切酶,能够特异性识别并切割DNA中的错配碱基对、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA以及异源双链DNA。这种酶在基因编辑领域,尤其是CRISPR-Cas9技术中,被广泛用于检测基因突变和编辑效率。 功能与特性 错配识别:T7EI能够识别DNA中的不完全配对碱基对,并在错配位点的5'端切割第一、第二或第三个磷酸二酯键。 高特异性:该酶对特定DNA结构具有高度特异性,能够有效区分野生型和突变型DNA。 应用广泛:除了用于基因编辑效果的检测,T7EI还可用于分解四方向交叉DNA、检测或切割异源双链DNA、随机切割线性DNA进行shot-gun克隆。 在CRISPR基因编辑中的应用 在CRISPR-Cas9基因编辑中,T7EI常用于检测目标基因是否成功引入突变。具体步骤如下: PCR扩增:分别以野生型和突变型DNA为模板,扩增包含突变位点的DNA片段。 变性与退火:将PCR产物变性后退火,形成异源双链DNA。 酶切反应:加入T7EI,在37℃下反应15-30分钟,通过琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果。
操作简单:无需脱色或冲洗,可直接使用紫外凝胶透射仪观察。
DL2000 Plus DNA Marker是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由8条线状双链DNA片段组成,条带大小分别为100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp、2000 bp、3000 bp和5000 bp。其中,750 bp条带的浓度最高,约为20 ng/μL,其余条带浓度约为10 ng/μL。产品特性 即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 μL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰锐利,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶电泳,不推荐用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取2-5 μL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。电泳条件:凝胶浓度:1.0%-2.0%。电泳缓冲液:1×TAE或0.5-1×TBE。电压:5-10 V/cm,电泳时间20-40分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
上海保藏生物技术中心是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在上海市等地区的化工中汇聚了大量的人脉以及客户资源,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是**好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同上海保藏生物技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长!