通过对比不同GC含量和引物Tm值的体系,该试剂盒在多种复杂条件下均能保持高特异性,生成清晰的扩增曲线
在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的分析技术,用于分离和检测DNA片段。而10×DNA Loading Buffer则是这一实验中不可或缺的重要试剂。它是一种10倍浓缩的上样缓冲液,专门用于DNA凝胶电泳,能够帮助DNA样品顺利沉入凝胶加样孔中,并在电泳过程中提供清晰的指示。 10×DNA Loading Buffer的主要成分包括甘油、溴酚蓝、二甲苯青FF和SDS。甘油的作用是增加样品的密度,确保DNA样品能够沉入凝胶孔中,防止样品漂浮。溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,分别指示电泳的进程,帮助实验者判断电泳是否达到最佳分离效果。在1%琼脂糖凝胶中,二甲苯青FF的迁移速率与4000个碱基对的DNA片段大致相同,而溴酚蓝的迁移速率则与约500个碱基对的DNA片段相同。 使用10×DNA Loading Buffer时,通常按照1:9(上样缓冲液:DNA样品)的比例混合。例如,对于9μL的DNA样品,加入1μL的10×DNA Loading Buffer,混匀后即可上样。这种缓冲液适用于多种类型的DNA样品,包括PCR产物、质粒DNA和基因组DNA等。
稳定性强:在室温下稳定,耐光性强,可在酸性或碱性缓冲液中长时间保存。
GoldenView II 吖啶橙核酸染料是一种新型的荧光染料,专为琼脂糖凝胶电泳设计,可替代传统的溴化乙锭(EB)。它结合了吖啶橙的荧光特性,具有更高的灵敏度和安全性。产品特性GoldenView II 吖啶橙核酸染料与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度比EB强5-10倍。它在与双链DNA结合时发出绿色荧光,与单链RNA结合时发出橙色荧光,激发波长为488 nm,发射波长分别为530 nm(绿色)和640 nm(橙色)。使用方法GoldenView II 的使用方法与EB相同,适用于琼脂糖凝胶电泳。在电泳前,将染料稀释至工作浓度(通常为1×),加入凝胶溶液中,轻轻摇匀后倒胶。电泳结束后,使用紫外灯或蓝光灯观察荧光条带。安全性与EB相比,GoldenView II 更安全,具有更低的诱变性和毒性。它在世界卫生组织国际癌症研究机构的致癌物清单中属于3类致癌物,使用时仍需注意防护。应用范围GoldenView II 不仅适用于琼脂糖凝胶电泳,还可用于细胞染色。它能够透过细胞膜,使细胞核中的DNA和RNA染色,在荧光显微镜下可观察到细胞周期状态。
在基因克隆和重组DNA技术中,DNA Marker II 可用于鉴定质粒酶切产物的大小,验证基因片段
SYBR Green I是一种高灵敏度的荧光染料,广泛应用于核酸电泳和定量PCR等领域。其10000×浓缩液形式为实验操作提供了极大的便利,能够显著提高核酸检测的效率和灵敏度。产品特性SYBR Green I与双链DNA(dsDNA)结合后,荧光强度可增强1000倍,其检测灵敏度是传统溴化乙锭(EB)的25-100倍。这种染料在紫外光或可见光下均能发出明亮的绿色荧光,背景信号低,信噪比高,能够清晰地显示核酸条带。应用范围SYBR Green I适用于多种核酸分析方法,包括琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳。此外,它还常用于实时定量PCR(qPCR)中,通过检测荧光强度的变化来定量分析DNA或cDNA的扩增。使用方法 SYBR Green I可以采用预染或后染的方法进行核酸染色。预染时,将10000×的SYBR Green I稀释100倍,加入样品中室温孵育10分钟后再进行电泳。后染时,将电泳后的凝胶浸泡在稀释后的染色液中,室温振荡染色10-30分钟。在qPCR中,SYBR Green I通常以0.2×到1×的终浓度加入反应体系中。
其中,750 bp条带的浓度通常较高(约100 ng/5 µL),便于观察和作为参考。
热敏感性双链脱氧核糖核酸酶(Thermolabile dsDNase)是一种重组表达的酶,具有特异性剪切双链DNA(dsDNA)的能力,同时对单链DNA(ssDNA)和RNA几乎无活性。这种酶在RNA样品的纯化过程中表现出色,能够快速、安全地去除基因组DNA污染。 产品特性 特异性:仅剪切双链DNA,对单链DNA和RNA无活性。 热敏感性:在55℃加热5分钟即可完全失活,适合在反转录前快速去除RNA样品中的基因组DNA污染。 高效性:2分钟孵育即可完成消化,比牛DNase I的活力约高30倍。 来源:由毕赤酵母(Pichia pastoris)重组表达。 纯度:SDS-PAGE检测纯度≥95%,无其他DNA内切酶与外切酶活性,不含RNA酶活性。 应用场景 RNA纯化:制备不含DNA的RNA样品。 反转录前处理:在反转录前去除RNA样品中的基因组DNA污染。 体外转录后处理:去除T3、T7、SP6等RNA聚合酶催化的RNA合成后的模板DNA。 使用方法 保存条件:-20℃保存,12个月有效。 反应条件:37℃孵育2分钟。 失活条件:55℃加热5分钟。
Plant Direct PCR Master Mix (2×) 是一种专为植物样本设计的预混液
在分子生物学研究和临床检测中,多重实时荧光定量PCR(qPCR)技术因其能够同时检测多个靶标而备受关注。然而,多重qPCR实验的成功依赖于高特异性、高灵敏度以及可靠的防污染体系。Multiplex Probe qPCR Mix (2X, UDG Plus)凭借其卓越的性能,成为实现这一目标的理想选择。 该试剂盒是一种2×预混液,专为多重qPCR设计,支持探针法进行高效的基因定量分析。它含有化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶、优化的反应缓冲液、dNTPs以及UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶)。UDG通过降解含有尿嘧啶的DNA,有效防止了PCR产物的气溶胶污染,从而避免假阳性结果的出现。 此外,该试剂盒还采用了dUTP替代dTTP的技术,进一步提高了反应的特异性,减少了非特异性扩增的可能性。其优化的反应体系能够支持多达四重的qPCR反应,大大提高了实验效率。 Multiplex Probe qPCR Mix (2X, UDG Plus)不仅操作简便,还具有广泛的适用性。它适用于多种qPCR仪器平台,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Eppendorf等品牌。
该产品预混了高浓度的ROX参考染料,适用于需要高浓度ROX校准的qPCR仪器,能够有效校正孔间荧光
2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专门用于变性核酸电泳的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链构型,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分 该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。 使用方法样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合,70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性,之后立即置于冰上冷却。上样与电泳:将处理后的样品加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。
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