它能够在高盐环境下保持高效活性,尤其在500 mM NaCl条件下表现出最佳活性。
在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,为研究人员提供了一个高效、防污染且便捷的一步法qPCR解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 UDG技术是该试剂盒的核心亮点之一。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。
二甲苯青迁移速度较慢,适用于较大片段的示踪;溴酚蓝迁移速度较快,适用于较小片段的示踪。
NTP Set (100 mM each, Nuclease free) 是一种包含ATP、CTP、GTP和UTP的核苷酸溶液套装,每种核苷酸的浓度均为100 mM,且经过严格测试,确保无DNase、RNase、磷酸酶和蛋白酶污染。这种套装广泛应用于分子生物学和生物化学实验中,是体外转录、RNA合成与扩增等实验的常用试剂。 产品特点 高纯度:纯度≥99%,经过HPLC验证。 无核酸酶污染:使用无核酸酶水配制,确保RNA和DNA的完整性。 稳定性高:在-20℃条件下可稳定保存长达2年,避免反复冻融。 用途广泛:适用于体外转录、RNA合成与扩增、siRNA合成等多种实验。 应用场景 体外转录:用于SP6、T3和T7 RNA聚合酶的反应,生成高质量的RNA。 RNA合成与扩增:提供能量支持,确保反应顺利进行。 siRNA合成:用于合成小干扰RNA,用于基因沉默。 使用注意事项 避免反复冻融:反复冻融会降低NTP的效率。 低温操作:使用时需在冰上操作,并在使用后立即放回-20℃保存。 防止污染:实验过程中需戴一次性手套,避免RNase污染。
在琼脂糖凝胶电泳中DL2000DNAMarker可作为分子量标准帮助研究人员快速判断DNA片段的长度
2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专为变性核酸电泳设计的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链状态,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持其单链构型。 溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。使用方法 样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合,70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性。上样与电泳:处理后的样品可直接加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。储存条件该缓冲液应冷冻保存(-20℃),以保证其稳定性和有效性。
Probe qPCR Mix 采用快速反应体系,能够在短时间内完成扩增反应,大大提高了实验速度
Cas9 NLS(SpCas9-NLS)是一种经过改造的CRISPR/Cas9系统蛋白,来源于化脓性链球菌(Streptococcus pyogenes)。它通过在Cas9蛋白的N端或C端添加核定位信号(NLS),能够高效地进入细胞核,从而提高基因编辑的效率。 功能与特点 SpCas9-NLS保留了野生型Cas9的高效基因编辑能力,同时通过NLS的引导,能够快速进入细胞核,减少在细胞质中的滞留时间,从而显著提高基因编辑的成功率。此外,SpCas9-NLS在体外切割实验中表现出色,能够快速、特异地切割目标DNA。 应用场景 细胞基因编辑:SpCas9-NLS与sgRNA结合后,可以高效地进入细胞核,实现基因组的定点编辑。 体外切割实验:可用于体外检测sgRNA的切割效率,筛选高效的gRNA序列。 基因敲除与敲入:通过非病毒载体转染,实现基因的敲除或插入。 高保真基因编辑:一些经过优化的SpCas9-NLS突变体(如Cas9 HF-NLS)能够进一步降低脱靶效应,提高编辑的精确性。
它能够确保miRNA在电泳过程中保持单链状态,从而获得清晰的电泳条带,便于后续分析。
2×miRNA去离子甲酰胺凝胶上样缓冲液是一种专为miRNA电泳设计的试剂,能够有效变性核酸并提供清晰的电泳示踪效果,广泛应用于miRNA的分析和检测。组成成分 该缓冲液的主要成分包括:去离子甲酰胺(Formamide):高浓度的甲酰胺能够有效变性核酸,消除其二级结构,确保miRNA在电泳过程中保持单链状态。溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料,帮助观察电泳的进程。EDTA:螯合二价金属离子,防止核酸降解。使用方法样品混合:将miRNA样品与2×去离子甲酰胺凝胶上样缓冲液按1:1比例混合。变性处理:混合后的样品在70℃加热5-10分钟,然后立即置于冰上冷却。电泳上样:将处理后的样品加入尿素-PAGE胶或甲醛变性琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×miRNA去离子甲酰胺凝胶上样缓冲液主要用于miRNA的变性电泳,适用于尿素-PAGE胶和甲醛变性琼脂糖凝胶电泳。它能够确保miRNA在电泳过程中保持单链状态,从而获得清晰的电泳条带,便于后续分析。
4S Green Plus 是一种无毒、非致癌的核酸染料,其灵敏度与EB相当,能检测到低浓度的核酸。
6×甘油凝胶上样缓冲液 I× 是一种常用的核酸电泳辅助试剂,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,能够帮助核酸样品沉入凝胶加样孔,并通过示踪染料观察电泳进程。组成成分 6×甘油凝胶上样缓冲液 I× 的主要成分包括:甘油(Glycerol):含量为60%,用于增加样品密度,使样品能够沉入凝胶加样孔。溴酚蓝(Bromophenol Blue):含量为0.05%,作为示踪染料,用于观察电泳进程。二甲苯青(Xylene Cyanol FF):部分配方中还含有二甲苯青,用于更广泛的示踪。橙黄 G(Orange G):部分配方中添加橙黄 G,进一步扩展示踪范围。Tris-HCl 缓冲液:10 mM,pH 7.6,用于维持电泳过程中的稳定环境。EDTA:60 mM,用于螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。应用场景该缓冲液主要用于核酸(DNA 和 RNA)的琼脂糖凝胶电泳,适用于多种核酸样品的分析和检测。它能够帮助科研人员更清晰地观察核酸片段的迁移情况,从而准确判断核酸的大小和完整性。
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