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光滑青霉SHMCCD66821-新鞘氨醇菌属-Tris-氯化铵红细胞裂解液

Ultra-Long Master Mix (2×) 凭借其卓越的性能和便捷的操作流程,成为扩增选择

在分子生物学实验中,PCR技术的准确性和便捷性是科研人员追求的目标。Phusion Master Mix (2×) (With Dye)以其卓越的高保真性和预混染料的特性,成为了实现这一目标的理想选择。 Phusion Master Mix (2×) (With Dye)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专为高保真DNA扩增而设计。其核心成分是Phusion DNA聚合酶,这种聚合酶融合了Pfu DNA聚合酶的高保真性和Taq DNA聚合酶的高效合成能力,能够在保证高准确性的前提下快速扩增DNA片段。Phusion酶的保真度比普通Taq酶高出约50倍,甚至比Pfu酶更高,特别适合需要高准确性的实验,如基因克隆、突变分析和长片段扩增。 与无染料版本不同,Phusion Master Mix (2×) (With Dye)在配方中加入了预混染料,这使得实验人员在进行PCR反应后可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液。这种预混染料不仅节省了操作步骤,还减少了因手动添加缓冲液而导致的误差,提高了实验的重复性和可靠性。

在基因克隆和重组DNA技术中,DNA Marker II 可用于鉴定质粒酶切产物的大小,验证基因片段

在分子生物学实验中,长片段DNA的扩增一直是PCR技术的重要挑战。Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)凭借其卓越的长片段扩增能力和预混染料的便捷性,成为了这一领域的理想选择。 Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)是一种专为长片段DNA扩增设计的预混反应体系,其核心成分为Ultra-Long DNA Polymerase。这种聚合酶融合了多种酶的特性,能够在单次反应中高效扩增长达40 kb甚至更长的DNA片段。这种能力使其在基因组学研究、全基因合成以及复杂基因组区域的分析中具有无可比拟的优势。 与无染料版本不同,Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)在配方中加入了预混染料。这种设计使得实验人员在完成PCR反应后可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液。预混染料不仅节省了操作步骤,还减少了因手动添加缓冲液而导致的误差,提高了实验的重复性和可靠性。此外,染料的加入也便于实验人员在电泳过程中实时观察扩增产物的迁移情况,从而更直观地评估PCR反应的效果。

该试剂盒还采用了dUTP替代dTTP的技术,进一步提高了反应的特异性,减少了非特异性扩增的可能性。

在分子生物学实验中,PCR技术是基因扩增的核心手段,而dATP(脱氧腺苷三磷酸)作为DNA合成的基本原料之一,是PCR反应不可或缺的重要组成部分。 dATP Solution (100 mM)是一种高浓度的脱氧腺苷三磷酸溶液,专门用于PCR反应和其他需要DNA合成的实验。dATP是DNA合成过程中的四种脱氧核苷三磷酸(dNTPs)之一,它在DNA聚合酶的催化下,通过与模板DNA上的腺嘌呤(A)碱基配对,被嵌入到新合成的DNA链中。这种高浓度的dATP溶液能够为PCR反应提供充足的原料,确保DNA扩增的高效进行。 在PCR反应中,dATP的浓度对反应的效率和特异性有着重要影响。过高或过低的浓度都可能导致反应效率降低或非特异性产物的增加。因此,使用高纯度、高浓度的dATP溶液能够确保反应条件的优化,提高PCR的成功率和准确性。dATP Solution (100 mM)通常与其他三种dNTPs(dTTP、dCTP、dGTP)一起使用,以形成完整的dNTPs混合液,为DNA聚合酶提供所有必要的原料。

Probe qPCR Mix (2×) 可用于定量分析基因表达水平的变化帮助研究人员深入理解基因调控

50×TBE液体是一种高浓度的核酸电泳缓冲液,广泛应用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳实验中。TBE是Tris-Borate-EDTA的缩写,其主要成分包括Tris(氨基三羟甲基甲烷)、硼酸(Boric Acid)和EDTA(乙二胺四乙酸)。这种缓冲液因其高缓冲能力和良好的电泳性能而备受青睐。产品特性高缓冲能力:TBE缓冲液的缓冲能力较强,适合长时间电泳,能够维持稳定的pH值。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的小分子DNA片段,能够提供更高的分辨率。即用型设计:50×TBE液体为浓缩液,使用时只需用去离子水稀释即可,方便快捷。使用方法配制1×TBE工作液:取20 mL的50×TBE液体,加入980 mL去离子水,充分混匀。电泳条件:凝胶浓度:通常使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:建议4-10 V/cm,电泳时间根据片段大小调整。保存条件:室温保存,有效期一般为12个月。注意事项沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。缓冲液更换:TBE缓冲液的缓冲能力较强,但长时间电泳可能导致电泳槽过热,建议使用循环装置或及时更换工作液。

Phusion Master Mix (2×) (With Dye) 高保真性,快速扩展

T7 Endonuclease I(T7EI)是一种来源于T7噬菌体的核酸内切酶,能够特异性识别并切割DNA中的错配碱基对、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA以及异源双链DNA。这种酶在基因编辑领域,尤其是CRISPR-Cas9技术中,被广泛用于检测基因突变和编辑效率。 功能与特性 错配识别:T7EI能够识别DNA中的不完全配对碱基对,并在错配位点的5'端切割第一、第二或第三个磷酸二酯键。 高特异性:该酶对特定DNA结构具有高度特异性,能够有效区分野生型和突变型DNA。 应用广泛:除了用于基因编辑效果的检测,T7EI还可用于分解四方向交叉DNA、检测或切割异源双链DNA、随机切割线性DNA进行shot-gun克隆。 在CRISPR基因编辑中的应用 在CRISPR-Cas9基因编辑中,T7EI常用于检测目标基因是否成功引入突变。具体步骤如下: PCR扩增:分别以野生型和突变型DNA为模板,扩增包含突变位点的DNA片段。 变性与退火:将PCR产物变性后退火,形成异源双链DNA。 酶切反应:加入T7EI,在37℃下反应15-30分钟,通过琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果。

DNA Marker VII用于验证质粒酶切后的片段大小,确保酶切反应的完整性,快速估算DNA片段

在分子生物学实验中,PCR技术是不可或缺的工具,而Hot-Start Taq DNA Polymerase则是这一技术中的一颗璀璨明珠。它以其独特的机制和卓越的性能,为PCR反应的精准性和特异性提供了强有力的保障。 传统的Taq DNA聚合酶在室温下就具有活性,这意味着在PCR反应开始之前,引物可能会与模板发生非特异性结合,导致背景产物的产生,从而影响实验结果的准确性。而Hot-Start Taq DNA Polymerase通过特殊的化学修饰或物理方法,解决了这一问题。它在室温下处于“关闭”状态,只有在高温下才会被激活,从而有效避免了非特异性扩增的发生。 Hot-Start Taq DNA聚合酶的激活机制通常基于两种方式。一种是通过化学修饰,如在酶的活性位点引入可逆的化学基团,这些基团在高温下被去除,从而恢复酶的活性。另一种是通过物理方法,如将酶与抗体结合,抗体在高温下变性失活,从而释放出具有活性的Taq酶。无论哪种方式,其核心目标都是确保Taq酶在PCR反应的变性阶段才开始发挥作用。

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