λ DNA/HindIII酶切产物是琼脂糖凝胶电泳中常用的分子量标准用于快速准确地估算DNA片段大小
10× DNA/RNA非变性上样缓冲液是一种用于核酸电泳的浓缩缓冲液,广泛应用于DNA和RNA的非变性凝胶电泳。它主要由甘油、溴酚蓝、二甲苯青等成分组成。这种缓冲液在稀释至1×后,比重较大,能使核酸样品在加样后迅速沉入凝胶孔中,同时其中的染料可以作为电泳指示剂。 优势 适用范围广:适用于双链DNA、单链DNA、RNA引物、小RNA及特定RNA的电泳。 操作简便:使用时只需将核酸样品与缓冲液按9:1的比例混合即可。 安全无污染:无RNase杂质污染,确保RNA样品的完整性。 使用方法 混合样品:将DNA或RNA样品与10×非变性上样缓冲液按9:1的比例混合均匀。 上样:将混合后的样品加入凝胶加样孔中。 电泳:根据实验需求进行电泳,观察染料迁移情况以判断电泳进程。 注意事项 防止核酸降解:操作过程中需使用无RNase的耗材,避免RNA降解。 避免反复冻融:建议分装保存,避免反复冻融影响缓冲液性能。 染色:可在样品或凝胶中预先加入核酸染料,或在电泳结束后对凝胶染色。 10× DNA/RNA非变性上样缓冲液凭借其高效、安全和操作简便的特点,已成为分子生物学实验中核酸电泳的常用工具。
这种染料在紫外光或可见光下均能发出明亮的绿色荧光,背景信号低,信噪比高,能够清晰地显示核酸条带。
全能核酸酶(Benzonase Nuclease)是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的基因工程核酸内切酶,能够高效降解所有形式的DNA和RNA,包括单链、双链、线状、环状和超螺旋结构。其纯度≥99%,并带有His-tag,便于纯化和检测。 特性与优势 广谱降解能力:全能核酸酶能够将DNA和RNA降解为2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸,且不具有碱基识别特异性。 高稳定性:在广泛的条件下(如6M尿素、0.1M盐酸胍、0.4% Triton X100、0.1% SDS、1 mM EDTA、1 mM PMSF等)仍保持高效活性。 无蛋白酶活性:不具有蛋白水解活性,不会对蛋白质样品造成损伤。 His-tag:带有His-tag的全能核酸酶便于通过金属螯合层析进行纯化和检测。 应用场景 去除核酸污染:在生物制药中,全能核酸酶可用于去除疫苗、蛋白或多糖类生物制品中的核酸残留,使核酸含量符合FDA和国内的要求。 降低样品粘度:在细胞裂解后,全能核酸酶能够降解核酸,减少溶液粘度,便于后续操作。 细胞培养产物纯化:降解核酸,避免核酸对细胞产物的影响,提高纯化效率。
该产品预混了高浓度的ROX参考染料,适用于需要高浓度ROX校准的qPCR仪器,能够有效校正孔间荧光
2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专为变性核酸电泳设计的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链状态,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持其单链构型。 溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。使用方法 样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合,70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性。上样与电泳:处理后的样品可直接加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。储存条件该缓冲液应冷冻保存(-20℃),以保证其稳定性和有效性。
此外,RNase H还被用于研究RNA的二级结构和RNA在细胞内的代谢过程。
在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是一种广泛使用的高灵敏度和高特异性的基因表达分析技术。SYBR Green qPCR Mix (2×)作为一种专为qPCR设计的预混液,凭借其高效、便捷和高灵敏度的特点,成为了许多实验室的首选试剂。 SYBR Green qPCR Mix的核心优势 SYBR Green qPCR Mix (2×)是一种预配制的高浓度反应体系,专为qPCR实验设计。它含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、SYBR Green荧光染料以及热启动Taq DNA聚合酶。SYBR Green是一种能够特异性结合双链DNA的小分子荧光染料,在qPCR过程中,随着DNA扩增产物的增加,SYBR Green发出的荧光信号也随之增强。通过实时监测荧光信号的变化,可以实现对目标基因的定量分析。 高灵敏度与特异性 SYBR Green qPCR Mix (2×)具有极高的灵敏度,能够检测到低丰度的基因表达。其优化的反应体系确保了高效的DNA扩增,即使在复杂的样本中也能获得准确的定量结果。
安全性高:4S Green 是一种油性大分子染料,无法穿透细胞膜,诱变性远低于 EB。
Gel-Red是一种高灵敏度、低毒性的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB)。它具有与EB相同的光谱特性,能够在不改变现有成像系统的情况下直接替换EB。产品特性安全性高:Gel-Red是一种油性大分子(分子量>1000),难以穿透细胞膜,显著降低了细胞毒性和致突变性。灵敏度高:检测灵敏度比EB高8-10倍,尤其对小分子量DNA的检测更为灵敏。稳定性好:室温下稳定,可耐受微波加热,光稳定性强,操作无需避光。适用范围广:适用于琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳,可用于dsDNA、ssDNA和RNA的染色。使用方法胶染法(前染法):制备琼脂糖凝胶时,按1:10000的比例加入Gel-Red(例如,50 mL凝胶溶液中加入5 µL 10000×Gel-Red),混匀后倒胶。按常规方法进行电泳。泡染法(后染法):电泳后,将凝胶放入染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Red稀释3300倍),室温振荡染色30分钟。染色液可重复使用3次,4°C或室温避光保存1周。注意事项Gel-Red对玻璃和非聚丙烯材料有亲和力,建议使用聚丙烯容器。
这些变体不仅具有更高的耐热性,还能够适应不同的反应条件,满足各种实验需求。
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于基因表达分析、病原体检测和基因拷贝数变异分析等领域。然而,实验室中的PCR产物污染可能导致假阳性结果,严重影响实验的可靠性。此外,某些qPCR仪器(如部分ABI系列)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)通过整合低浓度ROX校正功能和UDG防污染技术,提供了一种高效、精准且可靠的qPCR解决方案。 低浓度ROX与UDG技术的双重优势 Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)结合了两种关键技术:低浓度ROX参考染料和UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)防污染系统。低浓度ROX能够有效校正孔间荧光信号的差异,确保荧光定量的准确性,特别适用于需要低浓度ROX的qPCR仪器(如部分ABI系列)。而UDG技术则通过降解含有尿嘧啶的DNA,防止实验室中的PCR产物污染,从而减少假阳性结果,提高实验的可靠性。
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