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噬热地芽孢杆菌-Recombinant Human HLA-A*02:01&B2M&CMV pp65 (NLVPMVATV) Monomer Protein,His-Avi Tag-假肠膜明串珠菌

优化了反应缓冲体系,能够在短时间内完成高效扩增。其快速热启动Taq酶的扩增效率比普通Taq酶更高

2× DNA/RNA变性PAGE胶上样缓冲液是一种2倍浓缩的核酸电泳上样缓冲液,专门用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。它通过变性处理,确保核酸在电泳过程中以单链形式迁移,从而实现更清晰的分离效果。 主要成分 该缓冲液的主要成分包括: 甲酰胺:用于变性核酸,确保核酸以单链形式迁移。 SDS:一种阴离子表面活性剂,有助于核酸的变性。 溴酚蓝和二甲苯青:作为电泳指示剂,便于观察电泳进程。 EDTA:螯合金属离子,防止核酸降解。 使用方法 样品准备:将核酸样品与2×变性PAGE胶上样缓冲液按1:1比例混合,使最终浓度为1×。 变性处理:将混合后的样品在95℃加热5分钟,然后迅速冷却至冰上。 上样:将处理后的样品加入聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中。 电泳:在适当的电压下进行电泳,直至指示剂迁移至凝胶的合适位置。 优势 高效变性:确保核酸在电泳过程中以单链形式迁移,提高分离效果。 清晰指示:溴酚蓝和二甲苯青作为指示剂,便于实时观察电泳进程。 高纯度:无RNase污染,确保RNA样品的完整性。

使用前建议在65℃水浴中加热5分钟,然后在冰浴中冷却3分钟,以避免COS位点的片段结合。

在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的技术,用于分离和分析DNA片段。而6×DNA Loading Buffer则是这一实验中不可或缺的重要试剂。 6×DNA Loading Buffer是一种六倍浓缩的上样缓冲液,主要用于DNA凝胶电泳。它含有甘油、EDTA、溴酚蓝和二甲苯青FF等成分。其中,甘油可以增加样品的密度,使样品沉入凝胶加样孔中,防止样品漂浮;EDTA则用于螯合金属离子,防止DNA降解。溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,分别指示电泳的进程,帮助实验者判断电泳是否达到最佳分离效果。 使用6×DNA Loading Buffer时,通常按照1:5(Loading Buffer:DNA样品)的比例混合。例如,对于5μL的DNA样品,加入1μL的6×Loading Buffer,混匀后即可加样。这种缓冲液适用于多种浓度的琼脂糖凝胶,溴酚蓝在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶中的迁移率分别与1Kb、0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同。

产品中预混了低浓度的ROX参考染料,适用于多种qPCR仪器平台,无需额外添加ROX,减少了实验误差

λ核酸外切酶(Lambda Exonuclease)是一种来源于λ噬菌体的核酸外切酶,能够特异性地作用于双链DNA,沿5′→3′方向逐步去除5′端的单核苷酸。这种酶在分子生物学实验中具有广泛的应用。 工作原理 λ核酸外切酶的最适底物是5′端磷酸化的双链DNA。它能够高效地从5′端逐步降解双链DNA,生成单链DNA或单核苷酸。该酶对单链DNA和非磷酸化的双链DNA底物的降解效率较低,分别只有磷酸化双链DNA的1%和5%。此外,λ核酸外切酶不能从DNA的切刻或缺口处起始消化。 应用场景 单链DNA制备:通过降解双链DNA的一条链,λ核酸外切酶可用于制备单链DNA。例如,在PCR产物中,使用5′端磷酸化的引物,可以通过λ核酸外切酶特异性降解其中一条链,从而获得单链DNA。 DNA末端修饰:在某些克隆实验中,λ核酸外切酶可用于去除DNA片段的5′端核苷酸,以实现特定的末端修饰。 基因编辑:在基因编辑技术中,λ核酸外切酶可用于处理线性化质粒,以提高同源重组的效率。 DNA损伤研究:λ核酸外切酶可用于研究DNA损伤和修复机制,通过降解损伤的DNA片段来模拟细胞内的DNA修复过程。

在琼脂糖凝胶电泳中DL2000DNAMarker可作为分子量标准帮助研究人员快速判断DNA片段的长度

T3 DNA连接酶是一种ATP依赖型的双链DNA连接酶,来源于T3噬菌体。它能够催化双链DNA中相邻的5'磷酸和3'羟基之间形成磷酸二酯键,广泛应用于分子克隆和基因工程。 工作原理 T3 DNA连接酶通过ATP提供能量,连接双链DNA的黏性末端和平末端。它对A/T突出末端的连接效率高于C/G末端,尤其在高盐环境下表现出色。在反应体系中加入PEG 6000可以显著提高其对平末端的连接效率。 特点 高盐耐受性:与T4 DNA连接酶相比,T3 DNA连接酶对NaCl的耐受性更高,能够在1.0 M NaCl或KCl的条件下保持95%的活性。 高效连接:对A/T突出末端的连接效率高于C/G末端。 反应条件:最佳反应温度为25℃,反应缓冲液中通常含有ATP、MgCl₂和PEG 6000。 应用 T3 DNA连接酶广泛应用于以下领域: 分子克隆:用于黏性末端和平末端DNA片段的连接。 定点突变:通过连接特定的DNA片段实现基因突变。 高盐体系连接:适用于需要高离子浓度的实验。 RNA连接:能够连接DNA和RNA杂合双链,用于生成DNA-RNA和RNA-DNA融合链接。

T4 DNA连接酶是一种在分子生物学中不可或缺的工具酶,广泛应用于基因工程和DNA操作中。

Trizol试剂是一种广泛应用于总RNA提取的试剂,因其高效裂解细胞和保护RNA完整性而备受科研人员青睐。其主要成分包括苯酚、异硫氰酸胍和β-巯基乙醇,这些成分协同作用,能够迅速破坏细胞结构,释放RNA,并有效抑制核酸酶的活性。 工作原理 Trizol试剂通过异硫氰酸胍和苯酚的协同作用,快速裂解细胞并释放核酸和蛋白质。在特定的pH条件下,RNA、DNA和蛋白质会根据其溶解度差异分层:RNA存在于水相中,DNA位于中间层,蛋白质则沉淀在有机层。通过离心分离各层后,可利用异丙醇沉淀RNA,并用75%乙醇洗涤,最终获得高纯度的RNA。 优势 高效性:Trizol试剂能够快速裂解细胞,提取过程通常在1小时内完成。 高纯度:提取的RNA纯度高,A260/280比值通常在1.8-2.0之间,适用于多种下游实验。 适用范围广:适用于多种样本类型,包括细胞、组织、细菌、酵母和病毒等。 操作简便:操作步骤简单,允许同时处理多个样本。

dNTP Mix是一种由 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP 组成的等摩尔混合溶液

T4 RNA连接酶2截短型(T4 RNA Ligase 2, Truncated)是一种经过基因工程改造的酶,仅包含T4 RNA连接酶2的N端249个氨基酸残基。它能够特异性地将5'端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA的3'羟基末端。与全长的T4 RNA连接酶2不同,截短型酶不需要ATP来发挥活性,但需要预腺苷化的底物。 特点 特异性连接:只能利用5'端预腺苷化的单链DNA或RNA作为3'端接头,大大降低了连接反应的背景。 无需ATP:连接反应不依赖ATP,减少了非特异性连接产物的生成。 高纯度和稳定性:蛋白纯度超过99%,酶活性高,稳定性好。 应用 T4 RNA连接酶2截短型广泛应用于以下领域: 小RNA文库构建:在二代测序(NGS)中,用于miRNA文库构建中RNA的3'端接头连接。 cDNA文库构建:将单链腺苷化引物连接至小RNA上,用于cDNA克隆文库构建。 链特异性cDNA文库构建:将单链腺苷化引物连接至RNA上,用于链特异性cDNA文库构建。

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