SYBR Green qPCR Mix是一种高性能的qPCR试剂,凭借其高灵敏度,为生物学研究的工具
FnCas12a(又称Cpf1)是一种由crRNA介导的DNA核酸内切酶,来源于弗朗西斯菌(Francisella tularensis)。作为CRISPR基因编辑系统的重要成员,FnCas12a凭借其独特的工作机制和优势,正在成为基因编辑和核酸检测领域的新宠。 工作原理 FnCas12a通过识别靶标DNA上的PAM序列(通常是TTN)来特异性结合并切割双链DNA,产生粘性末端。与Cas9不同,FnCas12a仅需要单个crRNA作为引导,且切割位点远离识别位点,这使得它在基因组编辑中具有更高的灵活性。此外,FnCas12a在完成顺式切割后,会被激活反式剪切活性,能够进一步切割体系中的任意单链DNA,这一特性被广泛应用于高灵敏度的核酸检测。 独特优势 高效编辑:FnCas12a切割后产生粘性末端,更利于基因组的精确编辑。 灵活性高:其切割位点远离识别位点,为连续多次编辑提供了可能性。 靶向范围广:FnCas12a对PAM序列的要求相对宽松,能够识别更多靶点。 检测灵敏度高:其反式剪切活性可用于快速检测靶标核酸,已被应用于HOLMES核酸快检技术。
此外,它还被用于DNA末端修饰,如将黏性末端转换为平末端,或在3'末端添加特定核苷酸。
在分子生物学实验中,DNA的完整性和准确性是实验成功的关键。Uracil-DNA Glycosylase(UDG)是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶,广泛应用于PCR反应和其他DNA合成实验中。然而,传统的UDG在反应结束后需要额外的处理步骤来失活酶活性,以防止对后续实验的干扰。热敏感型UDG(Heat-labile UDG,1U/μl)的出现,为这一问题提供了高效的解决方案。 热敏感型UDG的独特特性 热敏感型UDG(Heat-labile UDG)是一种经过工程改造的UDG,来源于细菌。与传统的UDG不同,这种酶在高温条件下(通常在95℃)会迅速失活。这一特性使其在PCR反应中具有显著优势。在反应开始前,UDG可以有效去除引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。而在PCR反应的高温变性步骤中,UDG会自动失活,无需额外的处理步骤,从而简化了实验流程。 热敏感型UDG的应用 热启动PCR:在PCR反应中,热敏感型UDG可以用于防止引物二聚体的形成和非特异性扩增。通过在反应前加入UDG,可以降解引物中的尿嘧啶,从而避免引物在反应前的非特异性结合。
对肠道病毒RNA进行4倍稀释系列检测,结果显示One Step RT-qPCR能够以更高的灵敏度检测
λ DNA HindIII + EcoRI是一种常用的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它是通过将λ噬菌体DNA用HindIII和EcoRI两种限制性内切酶完全酶切后获得的,具有明确的片段大小分布。产品特性片段组成:λ DNA HindIII + EcoRI Marker由13条双链DNA条带组成,片段大小范围从125 bp到21,226 bp。即用型设计:已预混1×上样缓冲液,可直接用于凝胶电泳。稳定性:室温保存一个月带型无变化,但建议低温保存以防止核酸酶污染。使用方法电泳条件:凝胶浓度:建议使用0.5%-1.0%的琼脂糖凝胶。电泳缓冲液:1×TAE或0.5-1×TBE。电压:6-8 V/cm,电泳时间30-60分钟。热处理:使用前建议在65℃水浴中加热5分钟,然后在冰浴中冷却3分钟,以避免COS位点的片段结合。上样量:根据加样孔宽度,取2-5 µL加入凝胶加样孔中。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
在多组分检测中,ROX染料的稳定信号为其他荧光信号提供了稳定的基线有助于更准确地分析多重qPCR反应
DNA Marker IV是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成,条带大小分别为500 bp、1000 bp、2000 bp、3500 bp、5500 bp和7000 bp。其中,2000 bp条带的浓度最高,约为100 ng/5 µL,其余条带浓度约为50 ng/5 µL。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取3-6 µL进行电泳。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰锐利,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取3-6 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。如果加样孔宽度小于5 mm,每次取5 µL即可;如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件:凝胶浓度:建议使用1.0%-1.5%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-30分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
Hot-Start Taq Master Mix 是一款专为高特异性、高灵敏度PCR反应设计
T4 UvsX Recombinase是一种来源于T4噬菌体的重组酶,属于RecA/Rad51家族的同源体,广泛应用于重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)技术中。该酶能够与单链DNA(ssDNA)结合并形成核酸蛋白复合物,通过寻找与双链DNA(dsDNA)的同源序列进行链置换反应,从而实现等温条件下的高效DNA扩增。产品特性高效结合与置换:T4 UvsX Recombinase能够稳定ssDNA,并在dsDNA中寻找同源序列,完成链置换反应。无核酸酶活性:该酶本身不具有核酸酶活性,不会降解DNA。温和反应条件:可在37-42℃的等温条件下进行反应,适合快速、灵敏的核酸扩增。应用场景T4 UvsX Recombinase是RPA技术的核心组分之一,广泛应用于以下领域:病原体检测:可用于检测多种DNA和RNA病原体,如中东呼吸综合征(MERS)、HIV-1、埃博拉病毒和COVID-19,检测下限通常低于100个拷贝。即时诊断(POCT):因其快速、简便的特点,非常适合现场快速诊断试剂的开发。
6×甘油凝胶上样缓冲液 I× 是一种常用的核酸电泳辅助试剂,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中。
DNA Marker VII是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成,条带大小分别为300 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp和2500 bp。其中,1500 bp条带的浓度较高(约100 ng/5 µL),显示为加亮带,便于在电泳后快速定位。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 µL进行电泳,使用方便。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取2-5 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。每1 mm × 1 mm的加样孔上样1 µL;如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件: 凝胶浓度:建议使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-30分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
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